سنجش SARS-COV-2 RT-qPCR (روش RT-PCR فلورسانس سه گانه)، تشخیص ژن های ORF1ab و N در SARS CoV 2
اصل | سه گانه فلورسانس RT-PCR |
فرمت | لوله |
نمونه | سواب نازوفارنکس / سواب دهانی / خلط |
گواهی | CE |
زمان خواندن | 1 ساعت |
بسته | 50T /100T |
دمای ذخیره سازی | 30 تا 15 درجه سانتیگراد |
ماندگاری | 6 ماه |
حساسیت | 100% |
اختصاصی | 99.10٪ |
دقت | 99.30٪ |
برش | 200 کپی در میلی لیتر |
سنجش SARS-COV-2 RT qPCR یک آزمایش واکنش زنجیره ای پلیمراز (PCR) رونوشت معکوس (RT) زمان واقعی (RT) است که برای تشخیص کیفی ژن های ORF1ab و N SARS CoV 2 در سواب نازوفارنکس (NP) طراحی شده است. نمونه خلط و سواب اوروفارنکس (OP) که توسط یک کارمند بهداشتی از بیماران مشکوک به کووید-19 توسط ارائه دهنده مراقبت های بهداشتی آنها جمع آوری شده است.
عملیات راحت
تشخیصهای سهجانبه در یک لوله (ژنهای ORF1ab و N، ژن RNAse P (RNP) انسانی) پرایمر و پروب به صورت مایع از قبل مخلوط شده
قابل اعتماد
سریع
نتیجه در حدود 1 ساعت
ابزارهای قابل اجرا:
ابزار Real-time PCR با کانال های FAM، TEXAS RED/ROX و HEX/VIC مانند ABI7500، ABI Q3، ABI Q6، Bio Rad CFX96.
پنومونی کروناویروس جدید (بیماری کروناویروس 2019، کووید-19).عفونت sars-cov-2 یک مشکل جدی بهداشت عمومی جهانی است که باعث خسارات اقتصادی شدید در سراسر جهان شده است و سازمان بهداشت جهانی (WHO) را وادار کرده است تا شیوع سارس-کوو-2 را به عنوان یک وضعیت اضطراری بهداشت عمومی و نگرانی بینالمللی توصیف کند.
غربالگری زودهنگام موارد مشکوک و جداسازی و درمان بیماران مبتلا به sars-cov-2 کلید کنترل شیوع این بیماری است، زیرا هیچ دارو یا واکسن خاصی برای درمان پنومونی نئوکرون وجود ندارد.در حال حاضر، استاندارد طلایی برای تشخیص عفونت sars-cov-2 واکنش زنجیره ای پلیمراز رونویسی معکوس (rt-pcr) است.از زمان انتشار ژنوم کامل sars-cov-2، آزمایشگاههای بهداشت عمومی، آزمایشگاههای بالینی و شرکتهای تشخیصی از کشورهای مختلف، انواع روشهای rt-pcr را برای تشخیص sars-cov-2 توسعه دادهاند که ژنها و مناطق ژنومی مختلف را هدف قرار میدهند. ژنوم ویروسی (orf1ab، rdrp، n، e، و غیره).
با این حال، روش rt-pcr اشکالات و کاستی های زیادی را در عمل آشکار کرده است، به ویژه در شرایط اضطراری بهداشت عمومی مانند شیوع فعلی سارس-کوو-2.روش های rt-pcr برای انجام دست و پا گیر هستند و نیاز به انجام آن بر روی ابزارهای pcr توسط تکنسین های آزمایشگاهی حرفه ای آموزش دیده دارند.
این امر پاسخگویی به تقاضای آزمایش در محل را دشوار میکند و برای مناطق دورافتاده یا بیمارستانهای اولیه با منابع محدود، نمونهها باید برای آزمایش به بیمارستان سطح بالاتر با امکانات تست rt-pcr منتقل شوند.این نه تنها وقت گیر است، بلکه خطر قرار گرفتن در معرض ویروس را نیز افزایش می دهد.علاوه بر این، rt-pcr برای آزمایش sars-cov-2 در طول همهگیری کووید-19 نرخ منفی کاذب بالایی (30 تا 50 درصد) را به دلایلی ایجاد کرد که همچنان یک مشکل غیر قابل چشم پوشی است.
واکنش خود مونتاژ DNA سنجاق سر کاتالیزوری (catalytichairpinassembly، cha) یک سیستم تقویت سیگنال اسید نوکلئیک بدون آنزیم همدما است.دو مجموعه از پروبهای DNA تک رشتهای مکمل با ساختار سنجاق سر بر اساس قطعه rna هدف در حال شناسایی طراحی شدهاند.هنگامی که قطعه هدف وجود ندارد، هر دو مجموعه DNA تک رشته ای در ساختار سنجاق سر وجود دارند.
هنگامی که قطعه RNA هدف در سیستم وجود دارد، دو مجموعه کاوشگر dna تک رشته ای با ساختار سنجاق سر به نوبه خود ساختار سنجاق سر را باز کرده و تحت اثر کاتالیزوری rna هدف، یک رشته دوتایی DNA را تشکیل می دهند.کل فرآیند کاتالیزوری قطعه RNA هدف را مصرف نمی کند، و قطعه rna هدف، دو مجموعه کاوشگر dna تک رشته ای را وادار می کند تا قبل از ادامه به دور بعدی واکنش، یک رشته دوتایی تشکیل دهند و در نتیجه تقویت سیگنال ایجاد شود.در نهایت، تشخیص قطعه RNA هدف با شناسایی کاوشگر DNA دو رشته ای به دست می آید.